微生物学实验教程

本书系国家精品课程“微生物生物学”及“普通高等教育‘十一五’国家级规划教材”《微生物学》的配套实验教材。

本书总结了作者多年的微生物学实验教学经验和部分科研成果，参考了多部国内外相关实验指导教材。全书内容和结构编排新颖，既重视介绍微生物学实验的基本原理和操作技能，又强调培养学生的自主创新意识和综合实践能力。本书共分六大部分，合计86个实验，涵盖了微生物的形态学研究、纯培养技术、营养实验、生理鉴定、遗传育种和综合性系列应用实验等。本书附录收录常用配方、检索表，同时开发配套的数字课程，可大大方便读者学习使用。

本书可作为高等学校生命科学类专业本科生实验教材，也可作为研究生和相关研究人员的参考用书。

目录
- 前辅文
- 第一部分微生物的形态学研究方法
  - Ⅰ微生物的形态观察
    - 实验一普通光学显微镜的使用及细菌的简单染色
    - 实验二细菌的革兰氏染色
    - 实验三细菌的荚膜染色
    - 实验四细菌的芽孢染色
    - 实验五细菌的鞭毛染色
    - 实验六放线菌的形态观察
    - 实验七放线菌的印片染色法
    - 实验八霉菌水浸标本片的制备与观察
    - 实验九霉菌接合孢子的培养与观察
    - 实验十酵母菌子囊孢子的培养与观察
    - 实验十一伞菌担子、担孢子的形态观察
    - 实验十二昆虫病毒多角体的染色与观察
  - Ⅱ微生物的生长和生长量的测定
    - 实验十三比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
    - 实验十四微生物细胞大小的测定
    - 实验十五微生物的显微直接计数法
    - 实验十六稀释平板计数法
    - 实验十七稀释培养计数法
    - 实验十八薄膜过滤培养法测定空气微生物数量
- 第二部分微生物的纯培养技术
  - Ⅰ培养基的配制流程
  - Ⅱ几种常用培养基的配制
    - 实验十九牛肉膏蛋白胨培养基的制备
    - 实验二十高氏一号合成培养基的制备
    - 实验二十一马铃薯蔗糖培养基的制备
    - 实验二十二麦芽汁培养基和米曲汁培养基的制备
    - 实验二十三马丁-孟加拉红培养基的制备
    - 实验二十四石蕊牛乳培养基的制备
  - Ⅲ 灭菌和消毒
    - 一、干热灭菌法
    - 二、湿热灭菌法
    - 三、过滤除菌
    - 四、紫外线杀菌
    - 五、化学药剂消毒杀菌
  - Ⅳ无菌操作接种技术
    - 一、接种前的准备工作
    - 二、接种方法
- 第三部分微生物的营养与环境条件
  - 实验二十五营养元素对黑曲霉生长的影响
  - 实验二十六氧气对微生物生长的影响
  - 实验二十七温度对微生物生长的影响
  - 实验二十八氢离子浓度对微生物生长的影响
  - 实验二十九紫外线杀菌实验
  - 实验三十化学药剂对微生物的作用
  - 实验三十一微生物的耐盐性实验
- 第四部分微生物的分离纯化与鉴定
  - Ⅰ分离纯化的一般方法
    - 实验三十二土壤中好气性细菌的分离与计数
    - 实验三十三用选择性培养基分离土壤中的固氮菌
    - 实验三十四土壤中放线菌的分离与计数
    - 实验三十五土壤中稀有放线菌的分离
    - 实验三十六弗氏放线菌的分离
    - 实验三十七土壤中真菌的分离与计数
    - 实验三十八酒曲中酵母菌的分离
    - 实验三十九沼液中产甲烷菌的分离
    - 实验四十污水中噬菌体的分离
    - 实验四十一土壤中藻类的分离
    - 实验四十二土壤中原生动物的分离
  - Ⅱ细菌生理鉴定的常规方法
    - 实验四十三各类微生物菌落的识别
    - 实验四十四唯一碳源实验
    - 实验四十五唯一氮源（无机氮）实验
    - 实验四十六糖、醇、糖苷类的分解实验
    - 实验四十七微生物对大分子含碳有机物的水解实验
    - 实验四十八微生物对含氮化合物的分解利用实验
    - 实验四十九 IMViC实验
    - 实验五十微生物的产酶实验
- 第五部分微生物遗传学实验
  - 实验五十一感受态细胞的制备与转化
  - 实验五十二三亲本杂交
  - 实验五十三细菌的专性转导
  - 实验五十四利用物理诱变因素UV诱发大肠杆菌营养缺陷型的筛选
  - 实验五十五亚硝酸诱发乳糖发酵突变型的筛选
  - 实验五十六转座子所引起的插入突变
  - 实验五十七细菌的互补测验
  - 实验五十八大肠杆菌的中断杂交实验
  - 实验五十九绿色荧光蛋白在大肠杆菌内的表达
  - 实验六十原生质体融合
  - 实验六十一红色面包霉的杂交
  - 实验六十二微生物菌种保藏
- 第六部分微生物系列应用实验
  - Ⅰ土壤细菌多样性研究
    - 实验六十三土壤中总DNA的提取
    - 实验六十四 16S rDNA-PCR扩增产物的DGGE检测
    - 实验六十五 BIOLOG-ECO微平板法检测土壤细菌代谢多样性
    - 实验六十六磷脂脂肪酸（PLFA）分析土壤微生物结构
    - 实验六十七利用生物传感器检测土壤中镉污染水平
  - Ⅱ 根瘤菌的分离及其共生固氮特性研究
    - 实验六十八从豆科植物根瘤中分离根瘤菌
    - 实验六十九根瘤菌巨大质粒的快速检测
    - 实验七十根瘤菌的结瘤实验
    - 实验七十一豆科植物根瘤固氮酶活性测定
    - 实验七十二用报告基因标记根瘤菌并检测标记菌株和根瘤
  - Ⅲ 苏云金芽孢杆菌
    - 实验七十三从土壤中分离苏云金芽孢杆菌
    - 实验七十四从虫体中分离苏云金芽孢杆菌
    - 实验七十五利用简单染色法观察苏云金芽孢杆菌伴孢晶体
    - 实验七十六碱溶法纯化苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白
    - 实验七十七苏云金芽孢杆菌晶体蛋白的生物活性测定
    - 实验七十八直接凝集反应鉴定苏云金芽孢杆菌的H抗原
  - Ⅳ食用菌生产技术
    - 实验七十九食用菌菌种的分离与培养
    - 实验八十食用菌的菌种生产
    - 实验八十一主要食用菌的栽培技术——木腐菌的栽培
    - 实验八十二主要食用菌的栽培技术——草腐菌的栽培
  - Ⅴ真核微生物基因工程
    - 实验八十三真菌总DNA的提取及检测
    - 实验八十四用PCR方法从真菌总DNA中克隆目的基因
    - 实验八十五构建重组酵母表达载体
    - 实验八十六重组载体导入酵母细胞（PEG/LiAc法）
- 主要参考文献
- 附录一常用培养基配方
- 附录二常用染色液的配制
- 附录三常用缓冲液的配制
- 附录四常用试剂、常用酸碱指示剂和常用消毒剂的配制
- 附录五微生物混浊度计数法麦兰云度计的配制与菌数对照表
- 附录六最大或然数统计表
- 附录七常用微生物学名

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