本书包括实验准备,以及氨基酸和蛋白质、核酸、酶、维生素、糖类、脂质、物质代谢、拓展性与综合性实验八个部分,共计22个实验项目,涵盖了生物制药领域中生物化学研究的常用方法和技术。本书选取的实验项目既包括旨在加强学生基本知识掌握的验证性实验项目,还包括融入新技术和新手段的拓展性和综合性实验内容。
本书编写方式采用模块化设计,使用者可根据本校教学需求和实验条件自由选取、组合形成自己的实验教学体系。随着实验室安全被日益重视,本书在实验准备部分增加了实验室安全教育和常用仪器与分析软件的使用等内容。数字课程配有教学课件、自测题、参考文献、实验报告和操作视频等资源,供读者观看使用。
本书内容全面,可操作性强,可作为高等院校生物制药及相关专业本科生的生物化学实验教材,也可供教师、研究生及科研工作者参考。
- 前辅文
- 实验准备
- 生物化学实验室安全教育
- 生物化学实验室常用仪器设备的使用和注意事项
- 生物化学实验常用软件工具概述
- 第一部分 氨基酸和蛋白质
- 实验1 氨基酸和蛋白质的化学性质
- 1-1 氨基酸和蛋白质的呈色反应
- 1-2 蛋白质的沉淀反应
- 实验2 蛋白质的含量测定
- 2-1 凯氏定氮法
- 2-2 双缩脲法
- 2-3 Folin-酚试剂法(Lowry法)
- 2-4 紫外吸收法
- 2-5 BCA法
- 2-6 考马斯亮蓝显色法
- 第二部分 核酸
- 实验3 大肠杆菌质粒DNA的提取、酶切与琼脂糖凝胶电泳鉴定
- 实验4 动物肝中DNA的提取和含量测定(紫外吸收法)
- 实验5 酵母RNA的提取和鉴定
- 第三部分 酶
- 实验6 酶的性质
- 6-1 酶的特异性
- 6-2 温度对酶活性的影响
- 6-3 pH对酶活性的影响
- 6-4 酶的激动与抑制
- 实验7 酶活力的测定
- 7-1 血清中谷丙转氨酶的活力变化观察
- 7-2 液化型淀粉酶活力和比活力的测定
- 实验8 底物浓度对酶活性的影响——蔗糖酶米氏常数的测定
- 第四部分 维生素
- 实验9 维生素C的提取和含量测定
- 实验10 维生素的定性鉴定——维生素A、B1和B
- 第五部分 糖类
- 实验11 枸杞多糖的提取和含量测定
- 实验12 土豆粉中还原糖与总糖的提取和含量测定
- 12-1 土豆粉中还原糖的提取和含量测定
- 12-2 土豆粉中总糖的提取和含量测定
- 实验13 无蛋白血滤液制备和血糖的测定
- 第六部分 脂质
- 实验14 鱼油中不饱和脂肪酸EPA与DHA的提取和含量测定
- 实验15 血清中甘油三酯和总胆固醇的含量测定
- 第七部分 物质代谢
- 实验16 肝线粒体中两条电子传递链的鉴定
- 实验17 糖酵解中间产物磷酸丙糖的鉴定
- 实验18 脂肪酸的β-氧化
- 实验19 动物组织中的转氨反应
- 第八部分 拓展性与综合性实验
- 实验20 酪蛋白的提取和性质测定
- 20-1 酪蛋白的粗提取
- 20-2 Sephadex G-75凝胶层析法分离酪蛋白与核黄素
- 20-3 Folin-酚试剂法(Lowry法)测定酪蛋白含量
- 20-4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法测定酪蛋白分子量
- 20-5 酪蛋白的两性反应和等电点测定
- 实验21 药物对小鼠炎症组织相关生化指标的影响
- 21-1 DSS诱导急性溃疡性结肠炎小鼠模型建立和盐酸小檗碱给药
- 21-2 谷胱甘肽(GSH)的测定
- 21-3 丙二醛(MDA)的测定
- 21-4 髓过氧化物酶(MPO)活力的测定
- 实验22 含非天然氨基酸绿色荧光蛋白的表达纯化和性质测定
- 22-1 绿色荧光蛋白的表达
- 22-2 亲和层析法纯化绿色荧光蛋白
- 22-3 电泳法检测绿色荧光蛋白纯度
- 22-4 绿色荧光蛋白的荧光性质测定