本书以基因克隆为主线，实验内容涉及核酸的提取与检测，靶基因的获取，基因定点突变、沉默与敲除，质粒的重组，原核及真核表达系统的构建与表达，蛋白质分析与目标产物分离等。每个实验板块由导言、知识导图以及5 ~ 9 个不同的实验组成，系统介绍了实验的相关基本原理，为同一实验项目提供了多种可供选择的实验方法，强调注意事项，并对实验相关的内容进行评议。第3 版还着重扩充了基因工程领域的新技术和新发展。
本书配套数字课程（http://abook.hep.com.cn/43951）提供了与教材相结合的教学课件、教学视频、彩图、拓展性阅读材料、实验仪器、操作要点图片、实验结果图片及实验报告范本等资源，便于教师教学和学生学习使用。
本书适用于高等学校生物技术、生物工程、生物科学等相关专业本科教学使用，也可供从事基因工程教学、科研、生产的工作人员和研究生参考。
- 前辅文
- 导论
- 1 核酸的提取与检测
- 1-1 基因组DNA 的提取
- 1-2 总RNA 和mRNA 的提取
- 1-3 噬菌体DNA 的提取
- 1-4 质粒DNA 的提取
- 1-5 核酸的检测
- 1-6 脉冲场凝胶电泳
- 1-7 宏基因组文库的构建
- 2 靶基因的获取
- 2-1 PCR 扩增
- 2-2 目的基因片段的获取
- 2-3 探针的标记及检测
- 2-4 核酸探针筛选基因文库
- 2-5 反转录PCR
- 2-6 RACE 方法
- 2-7 反向PCR
- 2-8 SiteFinding-PCR
- 2-9 功能基因的活性筛选
- 3 基因定点突变、沉默与敲除
- 3-1 基因定点突变
- 3-2 基因沉默技术
- 3-3 酵母基因的敲除
- 3-4 哺乳动物基因的敲除
- 3-5 植物基因的敲除
- 4 质粒的重组
- 4-1 T-A 克隆
- 4-2 感受态细胞的制备
- 4-3 重组质粒的转化
- 4-4 阳性克隆的筛选
- 4-5 DNA 序列测定与序列同源性分析
- 5 原核表达系统的构建与诱导表达
- 5-1 DNA 的酶切反应
- 5-2 靶DNA 片段的分离纯化
- 5-3 DNA 片段的连接
- 5-4 表达质粒的构建
- 5-5 Southern 印迹
- 5-6 靶基因的诱导表达
- 5-7 SDS-PAGE
- 6 真核表达系统的构建与表达
- 6-1 外源基因在酵母中的表达
- 6-2 外源基因在哺乳动物细胞中的表达
- 6-3 外源基因在植物细胞中的表达
- 6-4 qRT-PCR 分析
- 6-5 Northern 印迹
- 6-6 Western 印迹
- 6-7 荧光原位杂交
- 7 蛋白质的分析与目标产物分离
- 7-1 免疫荧光与激光共聚焦
- 7-2 双向电泳
- 7-3 酵母双杂交
- 7-4 蛋白质浓度的测定
- 7-5 亲和层析
- 参考文献
- 附录1 名词缩写
- 附录2 实验操作及仪器使用注意事项
- 附录3 如何撰写实验报告
- 附录4 常用碱基、氨基酸符号及缓冲液
- 附录5 大肠杆菌基因型
- 附录6 实验仪器
基因工程实验指导（第3版）数字课程与纸质教材一体化设计，紧密配合。立足全面展示实验设计的目的、方法与结果并反映学科快速发展的趋势和成果，数字课程 涵盖了教学课件、微视频、实验彩图、知识扩展、名词缩写和实验报告范本等内容，充分运用了多种形式的媒体资源，丰富了知识的呈现形式，更加贴合实验课程的 实际需要。在提升课程教学效果的同时，为学生学习提供了更多的思考和探索空间。
