本书以高效表达鼠源的GAPDH蛋白为例，从RNA的提取、定性与定量、cDNA的合成、表达载体的克隆、转染与表达，以及对蛋白表达的诱导与鉴定等设计了一系列相应的实验。每一个实验既简明扼要地介绍了相关理论，也详细描述了实验操作过程，还包括完成该实验过程中可能存在的问题。每个实验后均展示了理想的实验结果。该教材具有明确的思路和完整的内容，对生物学、医学以及药学本科生掌握分子生物学实验的基本技能具有较好的指导意义。
- 目录
- 前辅文
- 第1章 动物组织RNA的提取与电泳鉴定
- 实验1-1 动物组织RNA的提取
- 实验1-2 RNA的琼脂糖凝胶电泳检测
- 第2章 核酸与蛋白含量的测定——紫外分光光度法
- 第3章 细菌质粒DNA的碱法制备
- 实验3-1 质粒DNA的提取
- 实验3-2 质粒DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定
- 第4章 目的基因的RT-PCR
- 实验4-1 目的基因的RT-PCR
- 实验4-2 PCR产物电泳检测与胶回收
- 第5章 质粒与目的基因的酶切
- 实验5-1 质粒与目的基因的酶切
- 实验5-2 酶切产物电泳鉴定和纯化
- 第6章 目的基因与载体的连接、转化
- 实验6-1 DNA分子细胞外重组
- 实验6-2 重组DNA转化
- 第7章 转化子的筛选与目的蛋白鉴定
- 实验7-1 转化子筛选
- 实验7-2 目的蛋白Western斑点印迹法鉴定
- 实验7-3 目的蛋白Western印迹法实验
- 实验7-4 原核表达目的蛋白GSTmGAPDH的亲和吸附纯化
- 第8章 IPTG诱导大肠杆菌表达的最适条件
- 实验8-1 IPTG诱导时机对外源蛋白质表达的影响
- 实验8-2 诱导物IPTG的浓度对外源蛋白质表达的影响
- 实验8-3 IPTG诱导时间对外源蛋白质表达的影响
- 实验8-4 外源蛋白质诱导表达
- 第9章 实时定量PCR分析IPTG对启动子活性的调节作用
- 实验9-1 大肠杆菌RNA制备
- 实验9-2 实时定量RT-PCR检测大肠杆菌中mGAPDH mRNA的表达量
