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生命科学中的电子显微镜技术

样章
作者：
丁明孝 梁凤霞 洪健 李伯勤 王素霞 朱平
定价：
120.00元
ISBN：
978-7-04-053283-8
版面字数：
1080.000千字
开本：
16开
全书页数：
暂无
装帧形式：
平装
重点项目：
暂无
出版时间：
2021-07-29
读者对象：
高等教育
一级分类：
生物科学
二级分类：
细胞生物学

本书集结来自北京大学、纽约大学、浙江大学、山东大学、中科院生物物理所等20余家高等院校、科研院所的40余位电镜专家作为编写团队，倾情展现各家所长。全书分8章，涉及常规生物电镜样品制备技术，电镜原位成分分析技术，电镜三维重构技术，光电关联显微成像技术，植物组织的透射电镜样品制备技术，医学电镜超微病理诊断，电子显微镜的结构、原理及操作要点等生命科学电子显微镜技术的核心与前沿内容。每章相关技术内容均从发展史、基本原理、操作程序、操作要点等方面进行深入解读，并配有丰富的应用实例，极具实用性和参考性。全书图文并茂、数据翔实，配备参考文献、操作录像等丰富资料。

本书为从事电子显微镜相关工作必备的权威实验手册，可供各领域科研工作者和技术工作者使用。

  • 前辅文
  • 1 常规生物电镜样品制备技术
    • 1.1 超薄切片技术
      • 1.1.1 样品的取材
      • 1.1.2 固定
      • 1.1.3 浸洗
      • 1.1.4 脱水
      • 1.1.5 渗透和包埋聚合
      • 1.1.6 超薄切片
      • 1.1.7 超薄切片的电子染色
    • 1.2 微波制样技术
      • 1.2.1 基本原理、仪器和主要试剂
      • 1.2.2 微波制样操作程序
      • 1.2.3 其它微波处理方法
      • 1.2.4 微波制样技术展望
    • 1.3 高压冷冻固定及其相关技术
      • 1.3.1 冷冻固定的原理
      • 1.3.2 冷冻固定与化学固定的比较
      • 1.3.3 冷冻固定的方式
      • 1.3.4 高压冷冻技术
      • 1.3.5 冷冻替代技术
      • 1.3.6 高压冷冻固定和冷冻替代技术的评价
      • 1.3.7 高压冷冻及其相关技术应用实例
    • 1.4 负染色技术
      • 1.4.1 悬浮液样品的准备
      • 1.4.2 染色液的配制
      • 1.4.3 负染色制样方法
      • 1.4.4 负染色样品的电镜观察及分析
      • 1.4.5 负染色技术的进展
      • 1.4.6 负染色技术应用实例
    • 1.5 金属投影技术
      • 1.5.1 基本原理
      • 1.5.2 金属投影样品制备技术
      • 1.5.3 金属投影
      • 1.5.4 影响金属投影的因素
      • 1.5.5 核酸的电镜明场与暗场成像技术
      • 1.5.6 金属投影技术的应用
    • 1.6 冷冻蚀刻技术
      • 1.6.1 冷冻蚀刻技术操作程序
      • 1.6.2 快速冷冻深度蚀刻技术
      • 1.6.3 冷冻蚀刻技术操作中的注意事项
    • 1.7 扫描电镜生物样品制备技术
      • 1.7.1 常规扫描电镜生物样品制备
      • 1.7.2 扫描电镜特殊生物样品制备
      • 1.7.3 扫描电镜生物制样技术应用实例
  • 2 电镜原位成分分析技术
    • 2.1 免疫电镜技术
      • 2.1.1 免疫电镜技术的样品处理
      • 2.1.2 Tokuyasu冷冻超薄切片免疫标记技术
      • 2.1.3 低温含水树脂包埋后免疫标记技术
      • 2.1.4 免疫电镜双标记技术
      • 2.1.5 免疫电镜技术注意事项
      • 2.1.6 包埋前免疫标记技术
      • 2.1.7 免疫电镜技术实验的设计思路
    • 2.2 电镜酶细胞化学技术
      • 2.2.1 电镜酶细胞化学技术的特点
      • 2.2.2 电镜酶细胞化学技术的原理
      • 2.2.3 电镜酶细胞化学技术的一般流程和注意事项
      • 2.2.4 几种细胞器标志酶的细胞化学定位
    • 2.3 细胞成分的特殊染色及电镜示踪技术
      • 2.3.1 多糖的钌红染色法
      • 2.3.2 活性氧电镜细胞化学检测
      • 2.3.3 镧示踪电镜细胞化学技术
    • 2.4 电镜原位杂交技术
      • 2.4.1 原位杂交的原理
      • 2.4.2 电镜原位杂交的实验方法
      • 2.4.3 电镜原位杂交操作要点及注意事项
    • 2.5 电镜放射自显影技术
      • 2.5.1 电镜放射自显影的基本原理
      • 2.5.2 电镜放射自显影的操作步骤
      • 2.5.3 电镜放射自显影操作中几个值得注意的问题
    • 2.6 APEX2标记技术
      • 2.6.1 遗传电镜标签的应用现状
      • 2.6.2 APEX2标签的局限性
      • 2.6.3 实验方法
      • 2.6.4 常见问题
    • 2.7 X射线能谱分析技术
      • 2.7.1 X射线能谱分析的基本原理
      • 2.7.2 X射线能谱仪
      • 2.7.3 生物样品X射线能谱分析方法及应用
      • 2.7.4 生物薄标样和生物薄样品微区X射线能谱分析
      • 2.7.5 扫描电镜微区 X射线能谱分析
      • 2.7.6 X射线能谱分析应注意的要点
  • 3 电镜三维重构技术
    • 3.1 概述
    • 3.2 电子断层成像技术
      • 3.2.1 实现电子断层成像的技术条件
      • 3.2.2 电子断层成像的技术流程
    • 3.3 连续超薄切片的透射电镜三维重构
      • 3.3.1 电镜样品的制备
      • 3.3.2 电镜二维图像的获取
      • 3.3.3 三维图像处理
      • 3.3.4 展望
    • 3.4 连续超薄切片的扫描电镜三维重构
      • 3.4.1 工作流程及主要环节
      • 3.4.2 应用实例：整条线虫的三维重构
    • 3.5 聚焦离子束切面扫描电镜三维成像技术
      • 3.5.1 聚焦离子束简介
      • 3.5.2 聚焦离子束/电子束双束扫描电镜
      • 3.5.3 聚焦离子束/电子束双束扫描电镜三维成像
      • 3.5.4 聚焦离子束/电子束双束扫描电镜三维成像的主要步骤
    • 3.6 系列块表面扫描电镜三维成像技术
      • 3.6.1 系列块表面扫描电镜成像技术的工作原理
      • 3.6.2 样品的安装
      • 3.6.3 图像数据的采集和处理
      • 3.6.4 结果
    • 3.7 三维体扫描电镜技术的样品制备
      • 3.7.1 样品制备的一般流程
      • 3.7.2 样品制备实例
      • 3.7.3 展望
    • 3.8 电镜图像的三维重构与分析
      • 3.8.1 三维重构软件简介
      • 3.8.2 三维重构中的图像处理与矫正
      • 3.8.3 三维分割与重构成果表达
      • 3.8.4 FIB-SEM数据三维分割与重构操作实例
    • 3.9 单颗粒冷冻电镜三维重构技术
      • 3.9.1 单颗粒冷冻电镜样品制备
      • 3.9.2 冷冻电镜成像
      • 3.9.3 冷冻电镜图像采集
      • 3.9.4 冷冻电镜图像分析与处理
      • 3.9.5 单颗粒冷冻电镜三维重构
      • 3.9.6 生物大分子冷冻电镜三维结构后处理与分析技术
      • 3.9.7 应用实例
      • 3.9.8 展望
    • 3.10 电镜图像三维重构与分析的数学原理
  • 4 光电关联显微成像技术
    • 4.1 光电关联显微成像技术概述
      • 4.1.1 技术路线
      • 4.1.2 技术要点
      • 4.1.3 基本流程
    • 4.2 培养细胞的光电关联成像技术
      • 4.2.1 实验步骤
      • 4.2.2 常见问题分析
    • 4.3 冷冻光电关联技术
      • 4.3.1 基本原理
      • 4.3.2 操作程序
      • 4.3.3 操作要点
      • 4.3.4 图片解读及应用实例
  • 5 植物组织的透射电镜样品制备技术
    • 5.1 植物细胞的基本结构特点
      • 5.1.1 细胞壁
      • 5.1.2 质体
      • 5.1.3 液泡
    • 5.2 植物组织电镜样品制备的特殊性
      • 5.2.1 细胞壁存在的不利影响
      • 5.2.2 气体存在的不利影响
      • 5.2.3 液泡存在的不利影响
      • 5.2.4 低蛋白质浓度的不利影响
      • 5.2.5 植物取材时组织取向的影响
      • 5.2.6 植物样品电镜观察的特殊性
    • 5.3 植物组织处理过程中的关键问题
      • 5.3.1 取材
      • 5.3.2 固定条件与缓冲体系的选择
      • 5.3.3 排出组织内气体
      • 5.3.4 从脱水到包埋
      • 5.3.5 超薄切片和电子染色
    • 5.4 植物组织的透射电镜样品制备方法
      • 5.4.1 植物组织超薄切片样品的常规处理流程
      • 5.4.2 一些特殊样品的处理方法
    • 5.5 植物细胞化学技术
      • 5.5.1 植物细胞壁组分的定位
      • 5.5.2 其它植物细胞化学技术
    • 5.6 植物病理学样品的制备
      • 5.6.1 昆虫侵害样品
      • 5.6.2 线虫侵害样品
      • 5.6.3 真菌病害样品
      • 5.6.4 细菌病害样品
      • 5.6.5 病毒病害样品
  • 6 医学电镜超微病理诊断
    • 6.1 超微病理诊断概述
      • 6.1.1 超微病理诊断在临床疾病诊断中的作用及局限性
      • 6.1.2 超微病理诊断的必备条件
      • 6.1.3 超微病理诊断的基本原则及注意事项
    • 6.2 超微病理诊断样本制备
      • 6.2.1 超微病理诊断样本的种类及取材方法
      • 6.2.2 超微病理诊断的超薄切片技术
      • 6.2.3 超微病理诊断样本的快速聚合方法
      • 6.2.4 自动组织处理机在超微病理诊断样本制备中的应用
      • 6.2.5 石蜡包埋样本改作超微病理诊断样本的制备方法
      • 6.2.6 免疫电镜技术在超微病理诊断中的应用
    • 6.3 肾疾病的超微病理诊断
      • 6.3.1 肾活检样本的电镜取材与定位
      • 6.3.2 肾的正常超微结构
      • 6.3.3 肾疾病的超微病理诊断
    • 6.4 骨骼肌及周围神经疾病的电镜超微病理诊断
      • 6.4.1 骨骼肌及周围神经组织样本的取材及电镜样本制备
      • 6.4.2 骨骼肌及周围神经组织的超微病理诊断
      • 6.4.3 肌肉病及周围神经病的电镜诊断实例
    • 6.5 肿瘤的超微病理诊断
      • 6.5.1 肿瘤超微病理诊断的优势及注意要点
      • 6.5.2 肿瘤超微病理诊断典型实例
    • 6.6 血液疾病的超微病理诊断
      • 6.6.1 血液电镜样品的制备和质量控制
      • 6.6.2 正常血细胞的种类
      • 6.6.3 部分血液病的电镜超微病理诊断要点
    • 6.7 肝疾病的超微病理诊断
      • 6.7.1 肝电镜样品的制备和质量控制
      • 6.7.2 肝的正常超微结构与基本病变
      • 6.7.3 常见肝细胞的超微病理改变
      • 6.7.4 部分肝疾病的电镜超微病理诊断要点
    • 6.8 Hermansky-Pudlak综合征的超微病理诊断
      • 6.8.1 整装血小板透射电镜技术
      • 6.8.2 整装血小板透射电镜技术操作程序
      • 6.8.3 操作注意事项
      • 6.8.4 HPS 超微病理诊断及基础研究实例
      • 6.8.5 展望
    • 6.9 原发性纤毛运动障碍
      • 6.9.1 纤毛的正常超微结构与生物学功能
      • 6.9.2 原发性纤毛运动障碍的电镜超微病理诊断
    • 6.10 医学病毒的形态鉴定
      • 6.10.1 病毒样本的处理
      • 6.10.2 病毒形态检测结果的分析
      • 6.10.3 病毒电镜检测的生物安全建议
      • 6.10.4 哺乳动物病毒形态鉴定实例
  • 7 电子显微镜的结构、原理及操作要点
    • 7.1 基础知识
      • 7.1.1 分辨本领、分辨率与有效放大倍数
      • 7.1.2 电子的波动性与粒子性
      • 7.1.3 磁透镜
      • 7.1.4 磁透镜的像差
      • 7.1.5 电子散射与电子显微成像
    • 7.2 透射电镜的结构、原理与操作要点
      • 7.2.1 透射电镜的结构
      • 7.2.2 衬度与图像形成
      • 7.2.3 透射电镜的合轴
      • 7.2.4 透射电镜操作注意事项
      • 7.2.5 关于生物医学电镜观察
    • 7.3 扫描电镜的结构、原理及操作要点
      • 7.3.1 扫描电镜概述
      • 7.3.2 扫描电镜的结构
      • 7.3.3 扫描电镜的成像原理
      • 7.3.4 扫描电镜主要操作步骤与注意事项
      • 7.3.5 生物样品扫描电镜观察易出现的问题及解决方法
  • 8 样品制备中值得注意的几个问题
    • 8.1 样品的取材
      • 8.1.1 哺乳动物基本组织取材的原则和要求
      • 8.1.2 其它生物样品的取材方法
    • 8.2 不同生物材料的样品制备方法
      • 8.2.1 小鼠不同组织的样品制备
      • 8.2.2 线虫的超薄切片样品制备
      • 8.2.3 植物细胞壁纤维素的扫描电镜观察
    • 8.3 生物样品制备的技巧与思路
      • 8.3.1 样品制备的技巧和思路
      • 8.3.2 信息的收集
      • 8.3.3 实验设计与最佳条件的优化
      • 8.3.4 实验实施与实验记录
      • 8.3.5 科研驱动的显微镜中心实验室
  • 附录
    • Ⅰ 电镜室的安全运行及废物处理
    • II 常用化学试剂安全注意事项
    • III 常用试剂的配制和贮存
    • IV 基本实验用具的制作
    • V 常用生物电子显微镜和制样设备
  • 索引
  • 插图

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