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基因工程实验指导（第4版）
本书以基因克隆为主线，实验内容涉及核酸的提取与检测，靶基因的获取，基因定点突变、沉默与敲除，质粒的重组，原核及真核表达系统的构建与表达，蛋白质的分析与目标产物分离等。每个实验板块由导言、知识导图以及7~9个不同的实验组成，系统介绍了实验的相关基本原理，为同一实验项目提供了多种可供选择的实验方法，强调注意事项，并对实验相关的内容进行评议。第4版还着重扩充了基因工程领域的新技术和新发展。
本书配套数字课程提供了与教材相结合的教学课件、教学视频、彩图、拓展性阅读材料、实验仪器、实验结果及实验报告范本等，便于教师教学和学生学习使用。
本书适用于高等学校生物技术、生物工程、生物科学等专业本科教学使用，也可供从事基因工程教学、科研、生产的工作人员和研究生参考。
作者：
朱旭芬
定价：
39.00 元
出版时间：
2025-07-10
ISBN：
978-7-04-060795-6
物料号：
60795-00
读者对象：
高等教育
一级分类：
生物技术/生物工程
重点项目：
战略性新兴领域-十四五 高等教育教材
版面字数：
570.00千字
开本：
特殊
装帧形式：
平装
页数：
284
最新印次时间：
2026年01月
- 目录
- 前辅文
- 导论
- 第一节 基因工程的四大要素
- 第二节 基因克隆的策略
- 第一节 基因工程的四大要素
- 1 核酸的提取与检测
- 1-1 基因组DNA的提取
- 1-2 总RNA和mRNA的提取
- 1-3 cDNA合成
- 1-4 质粒DNA的提取
- 1-5 核酸的检测
- 1-6 脉冲场凝胶电泳
- 1-7 宏基因组文库的构建
- 1-1 基因组DNA的提取
- 2 靶基因的获取
- 2-1 PCR扩增
- 2-2 目的基因片段的获取
- 2-3 探针的标记及检测
- 2-4 核酸探针筛选基因文库
- 2-5 反转录PCR
- 2-6 RACE方法
- 2-7 反向PCR
- 2-8 功能基因的活性筛选
- 2-1 PCR扩增
- 3 基因定点突变、沉默与敲除
- 3-1 基因定点突变
- 3-2 基因沉默技术
- 3-3 酵母基因的敲除
- 3-4 哺乳动物基因的敲除
- 3-5 CRISPR/Cas9基因编辑
- 3-6 动物基因的敲人
- 3-7 植物基因的敲除
- 3-1 基因定点突变
- 4 质粒的重组
- 4-1 T-A克降
- 4-2 感受态细胞的制备
- 4-3 重组质粒的转化
- 4-4 阳性克隆的筛选
- 4-5 Southern印迹
- 4-6 qPCR分析
- 4-7 DNA序列测定与序列同源性分析
- 4-1 T-A克降
- 5 原核表达系统的构建与诱导表达
- 5-1 DNA的酶切反应
- 5-2 靶DNA片段的分离纯化
- 5-3 DNA片段的连接
- 5-4 表达质粒的构建
- 5-5 Northern印迹
- 5-6 靶基因的诱导表达
- 5-7 SDS-PAGE
- 5-8 Western印迹
- 5-1 DNA的酶切反应
- 6 真核表达系统的构建与表达
- 6-1 酵母表达系统
- 6-2 动物表达系统
- 6-3 植物表达系统
- 6-4 qRT-PCR分析
- 6-5 荧光原位杂交
- 6-6 酶联免疫吸附测定
- 6-7 免疫共沉淀
- 6-8 免疫组化
- 6-9 免疫荧光染色
- 6-1 酵母表达系统
- 7 蛋白质的分析与目标产物分离
- 7-1 激光扫描共聚焦
- 7-2 双向电泳
- 7-3 酵母双杂交
- 7-4 硫酸铵沉淀法
- 7-5 凝胶过滤层析
- 7-6 离子交换层析
- 7-7 亲和层析
- 7-8 蛋白质浓度的测定
- 7-1 激光扫描共聚焦
- 参考文献
- 附录1 名词缩写
- 附录2 实验操作及仪器使用注意事项
- 附录3 如何撰写实验报告
- 附录4 常用碱基、氨基酸符号及缓冲液
- 附录5 大肠杆菌基因型
- 附录6 实验仪器
- 前辅文
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