本书是校企合作开发的教材,是“分子诊断技术数字课程”的配套教材。全书共十一章。第一章和第二章分别介绍基因和蛋白质检测定量的基本操作技术和原理。第三章和第四章是基于凯普公司拥有自主知识产权的导流杂交技术平台而设计的综合性实验,主要介绍利用导流杂交技术与PCR 相结合的检测技术平台,对人乳头状瘤病毒和地中海贫血的分子诊断。第五章和第六章是PCR- 荧光探针法对人乳头状瘤病毒和乙型肝炎病毒的分子诊断。第七章介绍重组质粒pMD-18-T-HPV18 的构建。以上七章内容为综合性实验,以临床疾病的基因或蛋白质为实验对象,所选实验项目具有可操作性强、实用性高等优点。第八章介绍分子诊断常用仪器的使用和日常维护保养。第九章介绍分子诊断临床样品的采集与前期处理。第十章介绍临床PCR 实验室。第十一章介绍自主设计性实验。
本书密切结合医学检验与分子诊断试剂生产企业的人才培养需求,以应用为导向,既能作为分子诊断技术实验课程的指导教材,亦可作为医学检验、分子诊断试剂生产公司技术人员以及其他相关领域的参考书。
- 前辅文
- 第一章 实时荧光定量PCR 检测P-glycoprotein 的基因表达
- 实验一 人源P-glycoprotein 基因序列的获取及其引物设计
- 实验二 A549-DDP 细胞中总RNA 的提取
- 实验三 紫外分光光度法测定A549-DDP 细胞的RNA 浓度和纯度
- 实验四 琼脂糖凝胶电泳鉴定RNA 纯度和完整性
- 实验五 A549-DDP 总RNA 的反转录和cDNA 浓度测定及纯度鉴定
- 实验六 实时荧光定量PCR 法对P-glycoprotein 基因的定量检测
- 第二章 免疫印迹法测定P-glycoprotein 的蛋白表达
- 实验一 A549-DDP 细胞中全蛋白的提取及电泳样品的制备
- 实验二 SDS-PAGE 法检测A549-DDP 细胞中全蛋白的表达
- 实验三 电转印法转移SDS-PAGE 凝胶上A549-DDP 细胞中全蛋白
- 实验四 考马斯亮蓝染色法和丽春红染色法检测电转印法的转膜效果
- 实验五 A549-DDP 细胞中P-glycoprotein 的相对定量分析
- 第三章 导流杂交基因芯片技术对人乳头状瘤病毒的分子诊断
- 实验一 HPV-6b 和HPV-18 大肠杆菌DNA 的分离纯化
- 实验二 紫外分光光度法测定大肠杆菌DNA 的浓度和纯度
- 实验三 HPV-6b 大肠杆菌菌株和HPV-18 大肠杆菌菌株DNA 的PCR 扩增反应
- 实验四 导流杂交基因芯片技术对HPV 的基因分型检测
- 第四章 导流杂交基因芯片技术对地中海贫血的分子诊断
- 实验一 固相提取法提取血液基因组DNA
- 实验二 紫外分光光度法测定血液基因组DNA 浓度及纯度
- 实验三 临床血液基因组DNA 的PCR 扩增反应
- 实验四 导流杂交基因芯片技术对α、β 地中海贫血的基因分型检测
- 第五章 PCR- 荧光探针法对人乳头状瘤病毒的分子诊断
- 实验一 HPV-18 大肠杆菌菌株DNA 的提取
- 实验二 多重荧光PCR 法对(12+2)高危型HPV 病毒核酸的检测
- 第六章 PCR- 荧光探针法对乙型肝炎病毒的分子诊断
- 实验一 固相提取法提取血液基因组DNA
- 实验二 PCR- 荧光探针法对HBV 病毒核酸的检测
- 第七章 重组质粒pMD-18-T-HPV18 的构建
- 实验一 PCR 法扩增目的基因
- 实验二 琼脂糖凝胶电泳鉴定扩增产物的纯度
- 实验三 PCR 扩增产物的回收及纯化
- 实验四 目的DNA 片段与载体的重组连接
- 实验五 连接产物转化
- 实验六 重组子的筛选与鉴定
- 实验七 大肠杆菌DH5α 的培养及菌株的保存
- 实验八 质粒提取
- 实验九 核酸定量分析及质粒拷贝数的计算
- 第八章 分子诊断常用仪器的使用与维护
- 第一节 移液器的使用、维护与校准
- 第二节 离心机的安全操作与保养维护
- 第三节 消毒灭菌设备的使用与维护
- 第四节 医用核酸分子杂交仪HB-2012A 的使用与维护
- 第九章 分子诊断临床样品的采集与前期处理
- 第一节 血液标本的采集与前期处理
- 第二节 血清标本的采集与前期处理
- 第三节 尿液标本的采集与前期处理
- 第四节 生殖道标本的采集与前期处理
- 第五节 宫颈脱落细胞标本的采集与前期处理
- 第十章 临床PCR 实验室介绍
- 第一节 临床PCR 实验室分区规划与设计原则
- 第二节 临床PCR 实验室各区主要功能及配置
- 第三节 临床PCR 实验室质量管理体系的建立
- 第四节 临床PCR 实验检测的全面质量保证
- 第五节 临床PCR 实验室防污染处理的一般措施
- 第十一章 自主设计性实验
- 实验一 沙眼衣原体/ 淋球菌/ 解脲脲原体混合感染的检测
- 实验二 耳聋易感基因的检测
- 实验三 葡糖-6- 磷酸脱氢酶缺乏症基因检测
- 实验四 苯丙酮尿症PAH 基因的检测
- 实验五 人巨细胞病毒核酸的检测
- 实验六 B 族链球菌DNA 的检测
- 实验七 乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒(PCR- 荧光探针法)的性能评价
- 实验八 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性的分析
- 附录一 常用试剂、缓冲液的配制
- 附录二 核酸和蛋白质电泳凝胶的配方及有效分离范围
- 附录三 核酸和蛋白质相关参数的换算
- 附录四 常用词汇的中英文对照
分子诊断技术实验指导数字课程(基础版)与纸质教材一体化设计,紧密配合。数字课程涵盖微视频、教学课件、知识拓展等多种形式媒体资源,拓展了教材内容,为学生学习提供思维与探索的空间。